Перспективы применения бактериофага М13 в качестве векторной вакцины против болезни Ньюкасла

Аннотация

Ньюкаслская болезнь птиц остается большой проблемой ветеринарной медицины и птицеводства в целом. Появление новых штаммов вируса болезни Ньюкасла (NDV) создает новые потребности в разработке вакцин, содержащих антигены более гомологичные новым штаммам. Так как вакцинация методом выпаивания или спрей-вакцинация более технологичны, в сравнении с инъекционными методами доставки антигена, мы предложили использовать в качестве средства доставки антигена бактериофаги. Для этого осуществили поиск бактериофагов пригодных для доставки рекомбинантного антигена (в составе белка слияния с капсидным белком бактериофага), через слизистые барьеры. Проведенные эксперименты на лабораторных животных позволили установить наиболее длительную циркуляцию в кровеносной системе бактериофагов М13 и PA136. Для разработки технологии создания рекомбинантных вакцин против болезни Ньюкасла на основе бактериофага М13 мы изучили доменную структуру белка F NDV, провели поиск B зависимых эпитопов и разработали системы праймеров для клонирования фрагмента белка F NDV в составе доменов Н1-1а белка F (33-55 аа) в позиции 4649 по 4715 п.н. и гена VIII бактериофага М13. Клонирование данной конструкции осуществлялось в экспрессирующий вектор pET32b. Наработка рекомбинантного белка одновременно с репликацией бактериофага М13 и упаковкой данного белка в капсид бактериофага возможна в системе кишечной палочки F+, что потенциально позволяет клонировать вариабельные, штаммоспецифичные участки белка F NDV напрямую из патологического материала и использовать такую рекомбинантную вакцину с целью праймирования классических, высокоиммуногенных вакцин.