Диагностические свойства синтетического антигена на основе иммуногенного эпитопа gp51 вируса лейкоза крупного рогатого скота

Аннотация

Диагностика лейкоза остается одной из ключевых проблем при проведении оздоровительных мероприятий в неблагополучных по данному заболеванию хозяйствах. Представлены разработка и изучение диагностических свойств синтетического пептида, представляющего собой аминокислотную последовательность эпитопов белка gp51 вируса лейкоза, в качестве антигена для ИФА при индикации данного возбудителя. По результатам сравнительного анализа иммуногенности эпитопов вирусных белков gp51, gp30 и p24 был отобран наиболее иммуногенный вариант – аминокислотная последовательность белка gp51 в позиции от 131 до 163 аа. На основе выбранной аминокислотной последовательности сконструирован синтетический пептид BLVpep, который характеризовался оптимальными физико-химическими показателями (растворимость, расчётные значения рН и изоэлектрической точки молекулы). При определении диагностических характеристик представленного выше пептида было установлено, что при использовании соответствующих конъюгатов BLVpep дифференцирует положительные сыворотки от BLV-отрицательных, а также сывороток крови здоровых и больных животных (кролика, овцы, козы, мыши, коз, больных артрит-энцефалитом (CAEV), и кошек, зараженных лейкозом (FeLV)). При определении чувствительности способа ИФА на основе BLVpep специфические антитела в положительных образцах выявлялись в разведении 1:1600. При исследовании 90 проб сывороток крови крупного рогатого скота продемонстрировано полное совпадение результатов ИФА на основе синтетического пептида и коммерческого набора. По результатам проведенного исследования показана возможность применения синтетического пептида BLVpep в диагностических серологических тестах.